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藥物分析輔導:腦得生片含量測定方法

來源:233網校 2006年9月15日
    腦得生片處方為:三七78g,川穹78g,紅花91g,葛根261g,山楂(去核)157g。
    2005《中國藥典》腦得生片含量測定項下:
    色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動相A,以水為為流動相B,按下表進行梯度洗脫;檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Rg1峰計算應不低于8000。
     供試品溶液的制備:取本品20片,除去糖衣,精密稱定,研細,取約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入水飽和的正丁醇50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)20分鐘,放冷,再稱定重量,用水飽和的正丁醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續濾液25ml,置分液漏斗中,加氨試液洗滌2次(15ml,10ml),取正丁醇液,蒸干,殘渣加甲醇使溶液,轉移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續濾液,即得。
    以葛根素為指標的:
    顏春華等用HPLC法測定腦得生片中葛根素的含量:儀器:日本島津LC-4A高效液相色譜儀;色譜柱為DiamonsilTM (鉆石) C18(200mm×4.6mm, 5μm);流動相為乙腈-甲醇-0.1%枸櫞酸溶液(5:25:75);流速10/min;紫外檢測波長250nm;柱溫室溫。樣品用甲醇超聲處理。
     譚生建等用用RP-HPLC法測定腦得生片中葛根素的含量:儀器:日本島津LC-6B高效液相色譜儀;分析柱為Shim-Pack CLC-ODS(15cm×6mm);ODS保護柱(5 cm×5mm);流動相為甲醇-水(25:75),柱溫35℃,檢測波長為450-800nm。
    孫立華等用高效毛細管電泳法測定葛根及其制劑腦得生片中葛根素的含量,以雙氯滅痛為內標物。儀器:Beckman P/ A system 5000 型毛細管電泳儀;運行緩沖液:30mmol/L硼砂溶液,操作電壓30kV,極性由正到負,紫外檢測波長254nm,柱溫25℃,采用壓力進樣,進樣時間 5s。毛細管沖洗方法:開機后用0.1mol/L氫氧化鈉溶液沖洗2min,運行緩沖液2min。每次測定之間運行緩沖液沖洗1min。
    以人參皂苷Rg1為指標的:
    聞平等用薄層掃描法測定腦得生片中人參皂苷Rg1的含量。以硅膠G為薄層板,展開劑為氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10,下層) 10℃以下分層,顯色劑為10%硫酸乙醇液。掃描波長為λS=525nm,λR=700nm,Sx=3。
     尤慧蓮等HPLC法測定腦得生片中人參皂苷Rg1的含量。采用Waters515-717-2487高效液相色譜儀;色譜柱為Diamonsil C18 (5μm250×4.6mm);流動相乙腈-0.05%磷酸溶液(1:4);流速1ml/min;檢測波長203nm;柱溫35℃。
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