活血止痛散處方為:當歸400g,三七80g,乳香(制)80g,冰片20g,土鱉蟲200g,自然銅(煅)120g。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-甲醇-1%磷酸溶液(1:1:5)為流動相;檢測波長為313nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計算應不低于2000。
供試品溶液的制備:取本品約2.3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加0.5%碳酸鈉溶液20ml,超聲處理(功率150W,頻率20kHz)30分鐘,提取液轉移至離心管中,離心(轉速為每分鐘3000轉)10分鐘,取上清液,置分液漏斗中,沉淀再用0.5%碳酸鈉溶液洗滌3次,每次20ml,棄去乙醚液,水溶液用鹽酸調節(jié)pH值至1~2,再用2%氯化鈉溶液飽和的乙醚振搖提取4次(25ml,25ml,20ml,20ml),必要時離心消除乳化層,合并乙醚提取液,回收乙醚至干,殘渣用甲醇溶解,轉移至25ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得(避光操作)。
文獻報道一般以阿魏酸為指標,采用HPLC法測定含量,如:
謝瑛等用HPLC法測定活血止痛散中阿魏酸的含量:儀器為LC-10AT 高效液相色譜儀;色譜柱為18烷基鍵合硅膠;流動相為,0.1mol/L KH2PO4-MECN ( 4:1 );流速1.0mL/min;檢測波長為313nm。樣品用甲醇超聲處理。
張嫻等用HPLC法測定活血止痛膠囊中阿魏酸的含量:儀器為Waters 510高效液相色譜儀;色譜柱為中科院大連化學物理所反相C18柱,Kromasil C18 (4.6mm×250mm,5μm),流動相為甲醇- 0.1 %三氟乙酸水溶液 (35:65);測定波長313nm;流速1.0 mL/min。樣品用50%甲醇超聲處理。